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簡要描述:牛輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格上海帛科生物相關產(chǎn)品:番瀉苷C CAS 37271-16-2 * 規(guī)格: 10mg芝素 CAS 607-80-7 * 規(guī)格: 20mg吡羅昔康 CAS * 規(guī)格: 100mg濱蒿內酯 CAS 120-08-1 * 規(guī)格: 20mg
詳細介紹
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
牛輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格 | Bovine Rotavirus(BRAV)RTPCR | BK-P8923 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
泊苷 CAS 33419-42-0 * 規(guī)格: 20mg
胡黃連苷III CAS C25H30O13 * 規(guī)格: 10mg
左旋堿 CAS 541-15-1 * 規(guī)格: 20mg
琥酯 CAS 88495-63-0 * 規(guī)格: 20mg
朝藿定C CAS 110642-44-9 * 規(guī)格: 20mg
當歸對照藥材 CAS * 規(guī)格: 1g
羅漢果苷ⅴ CAS 88901-36-4 * 規(guī)格: 20mg
三聚胺 CAS 108-78-1 * 規(guī)格: 200mg
番瀉苷C CAS 37271-16-2 * 規(guī)格: 10mg
芝素 CAS 607-80-7 * 規(guī)格: 20mg
吡羅昔康 CAS * 規(guī)格: 100mg
濱蒿內酯 CAS 120-08-1 * 規(guī)格: 20mg
阿苯唑 CAS 54965-21-8 * 規(guī)格: 100mg
氨溴索 CAS 23828-92-4 * 規(guī)格: 100mg
雙嘧莫 CAS * 規(guī)格: 50mg
牛輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格CCAAT增強子結合蛋白β(CEBPβ)重組蛋白 Recombinant CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb)
催素誘導蛋白(PIP)重組蛋白 Recombinant Prolactin Induced Protein (PIP)
多巴1α(MEP1α)重組蛋白 Recombinant Meprin A Alpha (MEP1a)
嗜鉻蛋白A(CHGA)重組蛋白 Recombinant Chromogranin A (CHGA)
脂蛋白脂酶(LIPD)重組蛋白 Recombinant Lipase, Lipoprotein (LIPD)
LLC-MK2(恒河猴腎細胞)5×106cells/瓶×2
BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細胞)5×106cells/瓶×2
人原位胰腺腺細胞 BxPC-3
非洲爪蟾胚胎細胞 ACTE1
小鼠畸胎瘤細胞 Pcc4
特級胎牛血清/Fetal bovine serum(Defined FBS)BR100/500毫升國產(chǎn)/進口
賴氨酸鐵瓊脂/LIA瓊脂/Lysine Iron Agar食品中沙門氏菌生化試驗250克國產(chǎn)/進口
WILKINS-CHALGREN瓊脂/WILKINS-CHALGREN厭氧菌瓊脂/WILKINS-CHALGREN Agar厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
50%卵黃鹽水/50%卵黃液/50% Egg-Yolk Solution卵黃鈉瓊脂或卵黃瓊脂或甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂的配套試劑50毫升國產(chǎn)/進口
人小腦顆粒細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
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