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簡(jiǎn)要描述:禽戊型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:仙鶴草酚B CAS 55576-66-4 * 規(guī)格: TLC鑒別用;10mg桂醛 CAS 104-55-2 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg柴胡皂苷B1 CAS 58558-08-0 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
詳細(xì)介紹
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
禽戊型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 | Avian Hepatitis E Virus(aHEV)RTPCR | BK-P8811 |
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
人參皂苷CK CAS 39262-14-1 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
圣草酚 CAS 552-58-9 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
仙鶴草酚B CAS 55576-66-4 * 規(guī)格: TLC鑒別用;10mg
桂醛 CAS 104-55-2 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
柴胡皂苷B1 CAS 58558-08-0 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
桑色素 CAS 480-16-0 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
銀杏內(nèi)酯A CAS 15291-75-5 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
雙氫素 CAS 71939-50-9 * 規(guī)格: UV≥98%;20mg
葛根素 CAS 3681-99-0 * 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
秦皮乙素 CAS 305-01-1 * 規(guī)格: ≥98%;20mg
伏格列波糖 CAS 83480-29-9 * 規(guī)格: 20mg
正 CAS * 規(guī)格: 50mg
酚-3-葡萄糖鼠李糖苷 CAS 40437-72-7 * 規(guī)格: 20mg
伊立康 CAS * 規(guī)格: 20mg
白果新酸 CAS 20261-38-5 * 規(guī)格: 20mg
禽戊型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格早期生長(zhǎng)應(yīng)答因子1(EGR1)重組蛋白 Recombinant Early Growth Response Protein 1 (EGR1)
HuH-7(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人膀胱細(xì)胞 5637
人肺細(xì)胞 NCI-H460
小鼠骨髓瘤細(xì)胞 FO
戊烷脒加入戊烷脒多粘菌素瓊脂50毫克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
鎂孔雀綠增菌液/鎂孔雀綠湯/RV湯/MM,RV Medium沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
苯丙氨酸脫羧酶培養(yǎng)基/苯丙氨酸瓊脂培養(yǎng)基/Phenylalanine Deaminase Medium用于細(xì)菌苯丙氨酸脫羧酶試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Candida Elective 瓊脂/BiGGY瓊脂/坎迪達(dá)尼克森選擇性瓊脂/鉍甘氨酸葡萄糖酵母瓊脂/BiGGY Agar食品中Candida及酵母菌總數(shù)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
中國(guó)藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于沙門氏菌的前增菌培養(yǎng)(GB4789.4-2010 ,GB4789.40-2010,SN0170-92和GB13091-91,ISO標(biāo)準(zhǔn))...
緩沖-甘油鈉溶液 規(guī)格: 250g 用途: 用于樣品的保存。(GB 4789.13-2010)
V-Fos-FBJ骨瘤病毒基因同源物(FOS)重組蛋白 Recombinant V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog (FOS)
鈣黏蛋白26(CDH26)重組蛋白 Recombinant Cadherin 26 (CDH26)
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