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簡(jiǎn)要描述:雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:抗生素8號(hào)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Antibiotic Agar NO.8250克去甲萬(wàn)古的效價(jià)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)SPCA250克用于細(xì)菌總數(shù)的計(jì)數(shù)平板計(jì)數(shù)瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)PCA250克食品細(xì)菌總數(shù)測(cè)定和平板計(jì)數(shù)MIU基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)MIU Medium Base250克細(xì)菌的復(fù)合生化試驗(yàn)
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法 | 50管/48樣 | 可見(jiàn)分光光度法 | BK-01S6965 |
商品介紹:
測(cè)定意義: 強(qiáng)堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物;紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無(wú)關(guān),故可用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)含量。該方法測(cè)定范圍為1~10mg蛋白質(zhì),適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品,尤其是動(dòng)物材料。 試劑組成和配置 1、雙縮脲試劑×1瓶,4℃保存; 2、10mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白×1支,-20℃保存; 3、標(biāo)準(zhǔn)蛋白配制:取10mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白100μl加雙蒸水100μl,即得5mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
2 mg Trequinsin(PDE III抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0 Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0 常溫保存
10mL DNA 溶解液 -20℃保存
2 ug pKK 232-8 pKK 232-8 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
R2A液體 R2A Liquid Medium 250g
1瓶 MDA-MB-435細(xì)胞株 MDA-MB-435 低溫運(yùn)輸和保存
去氧膽酸鹽瓊脂(DC) Desoxycholate Lactose Agar 250g
25mL 乙腈 Acetonitrile 密封陰涼保存
100mL TE Buffer,100X,pH7.6 TE Buffer,100X,pH7.6 常溫保存
5g L-肽(還原型) Glutathione 4℃保存
2 ug pTRE2 hyg pTRE2 hyg 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法C9orf114 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框114抗體 規(guī)格: 0.2ml
RASA3 Ras-GTP激活蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1mlAck1 醋酸激1抗體 0.2ml
NEK6 高度相似的細(xì)胞周期蛋白激NEK6抗體 規(guī)格: 0.2mlRNF17 環(huán)指蛋白17抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlproCNP/NPPC 促尿鈉排泄肽前體C抗體 規(guī)格: 0.1ml
TFF2 三葉肽因子2抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.3ml
Mouse Anti-rabbit IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1mlABCA1/ABC1 苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體 0.1ml
PAK6 P21蛋白激活的蛋白激6抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG 兔抗雞IgG 規(guī)格: 1mg
RAMP/CDT2 維甲酸調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白 規(guī)格: 0.2mlBS69/Adenovirus 5 E1A binding protein 毒5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1) 規(guī)格: 0.2ml
Brucella 布氏桿菌菌體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMSH3 錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
LAPTM4A 溶體相關(guān)膜蛋白4α抗體 規(guī)格: 0.2mlTPO 甲狀過(guò)氧化物抗體 規(guī)格: 0.2ml
STMN2/SCG10 神經(jīng)生相關(guān)蛋白SCG10抗體 規(guī)格: 0.1mlTNFSF18 瘤壞死因子配體超家族成員18抗體 規(guī)格: 0.1ml
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