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簡要描述:BCA蛋白法含量測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:胰胨大豆瓊脂斜面進口、國產(chǎn)Tryptic Soy Agar250克培養(yǎng)副溶血性弧菌,做 色素氧化實驗堿性蛋白胨水進口、國產(chǎn)AP250克增殖及付孟加拉紅進口、國產(chǎn)Rose Bengal Agar250克霉菌和酵母菌的總數(shù)測定BiGGY瓊脂進口、國產(chǎn)BiGGY Agar250克用于念珠菌的分離培養(yǎng)
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商品介紹:
測定意義: 樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。 測定原理: 堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱、胱、色、酪以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+;2分子的BCA與Cu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰*。 自備儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
BCA蛋白法含量測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6969 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pMAL-c5X pMAL-c5X 低溫運輸,-20℃保存
包姜氏(不含瓊脂) Bordet-Gengou Medium 250g
1瓶 RCFBF細胞株 RCFBF 低溫運輸和保存
KEA瓊脂(不含糖) KEA Agar 250g
25g L- 半 L- Cysteine 室溫干燥保存
50T 產(chǎn)氣莢膜梭菌C類磷脂基因(283bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
10mL 長效期SDS-PAGE還原劑 SDS-PAGE Reducing Agent 4℃保存
2 ug pYCP50-poly pYCP50-poly 低溫運輸,-20℃保存
50次 柱式細菌DNAout Column Bacterial DNAOUT 常溫保存(需要-20℃保存)
2 ug pGenesil- 1 pGenesil- 1 低溫運輸,-20℃保存
SOB SOB Medium 250g
BCA蛋白法含量測試盒可見分光光度法Phospho-eNOS (Thr113) 磷酸化氮合成3抗體(內(nèi)皮型) 規(guī)格: 0.1ml
human secretory IgA 人分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-p56Dok2(Tyr142) 磷酸化D酪激衰減蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-Bim(Ser69) 磷酸化細胞死亡調(diào)解子抗體 規(guī)格: 0.1ml
Morphine(2F11) 啡單克隆抗體 規(guī)格: 0.2ml
PLC β1/Phospholipase C beta 1 磷酯Cβ1抗體 規(guī)格: 0.2ml
SMYD3 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD3抗體 規(guī)格: 0.2ml
S100A7/Psoriasin S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體 規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Bio 標記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
ChAT ChAT乙酰轉(zhuǎn)移抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml
C12ORF4 12號染色體開放閱讀框4抗體 規(guī)格: 0.2ml
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