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簡要描述:亞鐵氧化酶(HP)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:強(qiáng)化梭菌進(jìn)口、國產(chǎn)RCM250克梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)TBB進(jìn)口、國產(chǎn)Tybobutyricum Broth Base250克乳酪產(chǎn)品中梭菌的計(jì)數(shù)SCHAEDLER厭氧菌瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)SCHAEDLER Agar250克厭氧菌的分離培養(yǎng)WILKINS-CHALGREN厭氧菌瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)WILKINS-CHALGREN Agar250克厭氧菌
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:亞鐵氧化酶(HP)測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6958
產(chǎn)品分類:其它系列
商品介紹:
測定意義: Hephaestin (HP)作為銅藍(lán)蛋白的同系物,是近年來發(fā)現(xiàn)的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白亞鐵氧化酶,HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內(nèi)鐵代謝。HP的表達(dá)可受鐵、銅及鋅等金屬離子的調(diào)節(jié)。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,在介導(dǎo)鐵的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中有重要作用。 測定原理: HP催化Fe2+氧化為Fe3+,Fe2+和ferrozine反應(yīng)顯色,在560 nm下有特征吸光值。通過測定Fe2+的減少速率可測得亞鐵氧化酶的活性。 自備用品: 可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
2 ug pLVX-cGFP II pLVX-cGFP II 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
BSSA BSSA Medium 250g
1瓶 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞株 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 低溫運(yùn)輸和保存
Andrade指示劑 100ml
1mg 鈣離子載體 Calcium Ionophore A23187 室溫避光保存
100mL Triton X-100 10%(w/v) Triton X-100 10%(w/v) 常溫保存
5mL 二氯異溶液,10mg/mL Dichloroisocoumarin Solution -20℃保存
2 ug pWPXL pWPXL 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
30次 石蠟包埋組織DNAout FFPE DNAOUT 常溫保存(溶液C需要-20℃保存)
2 ug p334 p334 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
氯化血紅素 hemin 1g
亞鐵氧化酶(HP)測試盒可見分光光度法Morphine(C1F3) 啡單克隆抗體 規(guī)格: 0.2ml
TAPA1/CD81 CD81抗體 規(guī)格: 0.1ml
dUTPase 脫氧三磷酸核苷水解抗體 規(guī)格: 0.1ml
BIN1 橋連整合因子蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
MAG-a/b 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 規(guī)格: 0.1ml
TIA1 細(xì)胞毒顆粒相關(guān)蛋白TIA-1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.5mlhuman serum 人清抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1mlTRPM5 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白5抗體(M亞家族) 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-CENP-A (Ser7) 磷酸化著絲粒蛋白A 規(guī)格: 0.1mlNCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
C5ORF33 5號(hào)染色體開放閱讀框33抗體 規(guī)格: 0.2mlCollagen X Ⅹ型膠原抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD105/Endoglin CD105抗體 規(guī)格: 0.1mlNinjurin 1 神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
IRAK2 白介素-1受體相關(guān)激2抗體 規(guī)格: 0.2mlSPTLC2 絲棕櫚酰轉(zhuǎn)移2抗體 規(guī)格: 0.2ml
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