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簡(jiǎn)要描述:甜菜堿含量測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:精致蛋白胨進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Peptone(From porcine meat)500克BR肉蛋白胨進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Beef Peptone250克BR蠶蛹蛋白胨進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)蠶蛹蛋白胨250克BR血粉蛋白胨進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)血粉蛋白胨250克BR
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商品介紹:
測(cè)定意義: 甜菜堿是一種廣泛分布于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿,是生物體內(nèi)的氧化產(chǎn)物,可以增強(qiáng)免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤,并可作為甲基供體,參與促進(jìn)動(dòng)物蛋白質(zhì)和脂肪代謝、增進(jìn)食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用,在化工、醫(yī)藥、食品添加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。 測(cè)定原理 甜菜堿在強(qiáng)酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液,在525nm處有特征吸收峰,測(cè)定525nm處的吸光值,可得樣品的甜菜堿含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、甲醇、、鹽酸和蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
甜菜堿含量測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6933 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
10mL 電泳級(jí)橙黃G溶液 Orange G Solution,EG 常溫,避光干燥保存
2 ug pG-Tf2 pG-Tf2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
臨床檢驗(yàn)系列
1瓶 HT1080細(xì)胞株 HT1080 低溫運(yùn)輸和保存
沙氏葡萄糖瓊脂顆粒(2015藥典) 250g
5mg 硫氧還蛋白 Thioredoxin -20℃保存
100mL Sodium Cacodylate Buffer(二甲胂酸鈉緩沖液),0.1M,pH6.5 Sodium Cacodylate Buffer,0.1M,pH6.5 常溫保存
1 管 Stbl4大腸桿菌 Stbl4 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pSE934 pSE934 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
5次 大提柱式植物RNAout Maxi Column Plant RNAOUT 4℃保存
2 ug pCFS119 pCFS119 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
甜菜堿含量測(cè)試盒微量法ATG16A/ATG16L1 自噬相關(guān)蛋白16A抗體 規(guī)格: 0.2ml
TP53I8/EI24 瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716) 磷酸化小板源性生因子受體B抗體 規(guī)格: 0.1ml
FbxO6 F-box蛋白相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml
FoxP3 叉蛋白P3抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD80/B7-1 刺激分子B7-1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
C17orf74 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體 規(guī)格: 0.2ml
AKT/PKB 蛋白激B 規(guī)格: 0.1ml
FMDV Polyprotein (3D polymerase) 口蹄疫毒 0.2ml
Cyclin D3 周期素D3抗體 規(guī)格: 0.1ml
UGT1A9 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移1A9 規(guī)格: 0.2ml
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