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簡(jiǎn)要描述:糖原含量測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:N6培養(yǎng)基 英文名稱:N6 Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g NLN培養(yǎng)基 英文名稱:NLN Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g white培養(yǎng)基 英文名稱:White Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g NS培養(yǎng)基 英文名稱:NS Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
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注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:糖原含量測(cè)試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6730
產(chǎn)品分類:糖代謝系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖,是糖的主要的儲(chǔ)存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度,當(dāng)血糖升高時(shí)可在肝臟合成糖原,血糖降低時(shí),肝糖原則分解為葡萄糖以補(bǔ)充血糖。因此,肝糖原對(duì)維持血糖的相對(duì)平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲(chǔ)存形式,在劇烈運(yùn)動(dòng)消耗大量血糖時(shí),肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span> 測(cè)定原理: 蒽酮法。利用強(qiáng)堿性提取液提取糖原,在強(qiáng)酸性條件下利用蒽酮顯色劑測(cè)定糖原含量。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、濃硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
100µL 小鼠抗GST標(biāo)簽單抗 Anti GST-Tag Mouse MAb -20℃保存
2 ug PT2/mCherry PT2/mCherry 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
200U AMV逆轉(zhuǎn)錄 AMV Reverse Transcriptase -20℃保存
2 ug pCYB 3 pCYB 3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
素B(1.2mg) Polymyxin B 1.2mg/支*5
25mg 核糖核酸 A,牛胰 RNase A,Bovine Pancreas 室溫干燥保存
50T 土拉桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
65 KU SOD(抗氧化) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
500mL Gelatin-Tween in TBS Gelatin-Tween in TBS 常溫保存
1.5mL 2X HotStart PCR Mix(即用型熱啟動(dòng)PCR試劑盒) Instant Hotstart PCR Mix -20℃保存
2 ug pKD13 pKD13 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
糖原含量測(cè)試盒可見分光光度法phospho-NFKB p65(Thr435) 磷酸化細(xì)胞核因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCDC65 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白65抗體 規(guī)格: 0.2ml
TRIM47 星形細(xì)胞瘤高表達(dá)蛋白抗體(環(huán)指蛋白100) 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Histone H2A.X (Ser139) 磷酸化組蛋白H2AX抗體 規(guī)格: 0.1ml
MMP20 基質(zhì)金屬蛋白20 規(guī)格: 0.2ml
Bcl rambo/Bcl 2 like 13 protein Bcl2樣凋亡蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml
CD244 CD244抗體 規(guī)格: 0.2ml
CPN2 羧肽CPN2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Integrin Alpha V + Beta 6 整合素αVβ6抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse anti-human IgM ascites 小鼠抗人IgM腹水 規(guī)格: 1ml
SLURP1/ANUP 抗瘤蛋白ANUP抗體 規(guī)格: 0.2ml
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