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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CL-0407NCTC 1469(小鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2雷美替胺質量規(guī)格：>98.5%Ramelteon

SELE Others Cynomolgus 食蟹猴 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照) 拉科酰胺質量規(guī)格：>98%Lacosamide

人腦微血管內皮細胞RNAHBMEC miRNA5 μg米那普侖鹽酸鹽 質量規(guī)格：>98%Milnacipran

MCF-7/ADR細胞，人癌細胞(耐阿霉素) 早代小鼠胚胎成纖維細胞,MEF細胞 AGS人胃腺癌細胞阿德福韋/阿德福韋酯（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Adefovir dipivoxil

MKN45(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2R-鹽酸普拉克索質量規(guī)格：度大于99%,R構型R-Pramipexole Di Monohydrate
GRC-1細胞，人腎癌細胞 鼠纖維肉瘤細胞系,WEHI 164細胞 CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋白血病細胞系)5×106cells/瓶×2鉬標準溶液(100µg/mL,基體: 1%HCl)質量規(guī)格：100µg/mL,基體: 1%HClMolybdenum standard

EJ(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2水質鎳標樣(濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標準品)質量規(guī)格：濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標準品Nickel standard

hCD34+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD34+祖細胞(hCD34+-CB)，單一來源 100000 人卵巢成纖維細胞HOF內消旋-2,3-二丁二酸(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid

MN-h, 小鼠海馬神經元吡哆醛-L-谷氨酸二鉀鹽[藥物研究配體]質量規(guī)格：藥物研究配體Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt

LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細胞裂解液 (陽性對照) 吡哆醛-L-異亮氨酸鉀鹽[藥物研究配體]質量規(guī)格：藥物研究配體Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt
ERBB4 Others Mouse 小鼠 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢喹諾質量規(guī)格：美國進口Cefquinome

人皮膚肥大細胞*培養(yǎng)基 100mL頭孢噻呋質量規(guī)格：美國進口Ceftiofur

ψ2細胞，小鼠胚成纖維包裝細胞 Jecket(瘤細胞) 大鼠肺細胞;WL1鹽酸頭孢噻呋(進口)質量規(guī)格：美國進口Ceftiofur

EFNA5 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)布立尼布質量規(guī)格：美國進口Brivanib

A-498(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細胞;J774A.14-苯甲酰-4'-二苯硫(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide
磷酸果糖激酶PFK測試盒人肺癌細胞;A-427 [A427] 大鼠破骨細胞*培養(yǎng)基 100mL虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷(標準品)Polydatin質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

EL4.IL-2 小鼠瘤細胞十八烷醇,1-十八醇(標準品)1-Octadecanol質量規(guī)格：>98%,標準品

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 十八烷醇,1-十八醇1-Octadecanol質量規(guī)格：>98%

人皮膚成纖維細胞;HSAS4Ruxolitinib (INCB018424)Ruxolitinib (INCB018424)質量規(guī)格：>99%

STAT4 Others Human 人 STAT4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) MK-1775,MK1775 MK-1775質量規(guī)格：>98%,Wee1激酶抑制劑
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。