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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | 即用型SABC-AP免疫組化試劑盒 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規(guī)格 | 1盒160張片 |
貨號 | BK-S64221 |
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規(guī)則:
HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞大麥芽堿(標準品)Hordenine質量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
RN-s, 大鼠紋狀體神經元 [X464-20C]細胞 Vero(非洲綠猴腎細胞)丹參素(標準品)Danshensu質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人十二脂腸腺癌;HuTu-80丹參素Danshensu質量規(guī)格:HPLC>95%,丹參提取
CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照) 丹參素鈉(標準品) Danshensu質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人結直腸腺癌細胞;LoVo丹參酮I(標準品)Tanshinone I質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PK-15(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2乙醇脫氫酶質量規(guī)格:>300U/mg,BRADA, Alcohol dehydrogenase
Promocell C-28030 Mononuclear Cell Medium, 單核細胞培養(yǎng)基(即用型) 500ml吐溫80(化學)質量規(guī)格:CPTween-80
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)乙酸二丙基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑IPC-DPAA (ca. 0.5mol/L in Water)
PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC (aa 453-1152) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸二戊基銨(約0.5mol/L水溶液)[離子對色譜級]質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑IPC-DAAA (ca. 0.5mol/L in Water)
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)乙酸二己基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]質量規(guī)格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑IPC-DHAA (ca. 0.5mol/L in Water)
牛腎細胞;MDBK(NBL-1)EGF鼠頜下腺表皮生長因子5克BR,99.5%
VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細胞裂解液 (陽性對照) 3,3’,5,5’-四基聯本安言醋鹽二水(TMB*2HCl*2H2O)(+4℃) 3,3',5,5'-TqTRcMqTHYLBqNZIDINq DIxy7noCHLORIDq HYDRcTq, 98+% 07738-08-7
彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mLDL-α-GlycerolphosphatesalthydrateDL-α-甘油嶙酸鹽500克GR
SGC-7901人胃腺癌細胞 SGC-7901 human gasic cancer cells 1640+10% FBSL-VALINEL-纈酸美國藥典級100G72-18-4RT
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標簽)4-nitnoaniline
即用型SABC-AP免疫組化試劑盒SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細胞 Human輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷 Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane質量規(guī)格:含量≥99%(GC)
BCHE Others Human 人 BCHE / CHE1 人細胞裂解液 (陽性對照) 雷替曲塞Raltitrexed質量規(guī)格:≥99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
人小氣道上皮細胞RNAHSAEpiC miRNA5 μgL-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽L-Ornithine L-aspartate salt質量規(guī)格:>98%
SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達莫Dipyridamole質量規(guī)格:>98%,USP
PC-3 人前列腺癌細胞他米巴羅汀Tamibarotene質量規(guī)格:≥99.0%
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