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乳酸含量(LA)測試盒微量法

簡要描述:乳酸含量(LA)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯 英文名稱:Bromcresol Purple Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ) 英文名稱:Listeria Enrichment Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 萘啶酮酸(4.0mg) 英文名稱:Nalidixic Acid 產(chǎn)品規(guī)格:4.0mg*5 七葉苷培養(yǎng)基 英文名稱:Es

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:643

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物,與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān),乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。

測定原理

乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,同時使NAD+還原生成NADHH+H+傳遞給PMS生成的PMSH2還原INT生成紅色物質(zhì),在530nm處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、離心機、可見分光光度計、微量石英比色皿、恒溫水浴鍋。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

乳酸含量(LA)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6587

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

10次 WGA 糖蛋白分離試劑盒 Glycoprotein Isolation Kit (WGA) -20℃保存

2 ug pEGFP- N1 pEGFP- N1 低溫運輸,-20℃保存

石蕊牛奶培養(yǎng)基 Litmus Milk Medium 250g

100mL 曲拉通 X-100 Triton X-100 室溫保存

50T 豬流感病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

200 mg Catalase(抗氧化) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

500mL Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered]  Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered]  常溫保存

50次 雙一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq) Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit -20℃保存

2 ug pLVX-IRES-mCherry pLVX-IRES-mCherry 低溫運輸,-20℃保存

1個 熒光尺 Fluorescent Ruler 室溫

1瓶 NR8383細胞株 NR8383 低溫運輸和保存

乳酸含量(LA)測試盒微量法Protamine 2  魚蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Cy7  Cy7標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

GIRK2/Kir3.2  G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

BTBD1  BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1(丙型毒的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8)抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-SHC(Tyr239/240)  磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

WDR26  心肌缺預處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-gp130(Ser 782)  磷酸化gp130抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM/Gold  膠體金標記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.5ml

APBA3/Mint3/X11gamma  β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

AKIRIN2  AKIRIN2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

SCAP/SREBF chaperone protein  固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

HSP70/HSPA1A  熱休克蛋白-70抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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