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簡要描述:氨基酸(AA)含量測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:Bolton肉湯 英文名稱:Boltom Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g Mueller-Hinton瓊脂(MHA) 英文名稱:Mueller-Hinton Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 1%馬尿酸鈉 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:0.4ml/支*20支 紙片(30ug/片) 英文名稱:Cephalosporin strip 產(chǎn)品規(guī)格:10片/瓶
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注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:氨基酸(AA)含量測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6530
產(chǎn)品分類:氨基酸代謝系列
商品介紹:
測定意義: 動(dòng)物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化最能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)。另外,氨基酸還能反應(yīng)灼傷、傷寒等方面情況。植物體內(nèi)氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時(shí)期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。 測定原理: 氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物,在570 nm有特征吸收峰;通過測定570 nm吸光度,來計(jì)算氨基酸含量。 自備儀器及用品: 臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、無水乙醇、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
消毒液中和肉湯 Disinfectant Neutralization Broth 250g
100mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 基鹽 (BCIP) BCIP -20℃保存
250mL Veronal Buffered Saline with Mg++ and Ca++ (VBS++) Veronal Buffered Saline with Mg++ and Ca++ (VBS++) 常溫保存
200mL Bradford法蛋白定量試劑盒 Staining Kit for His-Tag -20℃保存
2 ug pTRE-Tight-Luc pTRE-Tight-Luc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100次 磁珠血液DNAout MAG Blood DNAOUT 磁珠4℃保存,蛋白K溶液-20℃保存(勿反復(fù)凍融)
2 ug pSilencer 4.1-CMV neo pSilencer 4.1-CMV neo 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
CIN培養(yǎng)基 Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 250g
5g 蘇丹黑 B Sudan Black B 室溫保存
50T 玉米MON810/MS PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
15次 植物葉綠體純化試劑盒 Plant Chloroplast Purification Kit 4℃保存
氨基酸(AA)含量測試盒微量法EML4/C2orf180 限制過度增相關(guān)蛋白EML4抗體 規(guī)格: 0.2ml
TSLP (human) 胸基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素-1抗體(人) 規(guī)格: 0.2ml
CBFb/PEBP2B 多瘤毒增強(qiáng)了結(jié)合蛋白2β抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CD19(Ser227) 磷酸化CD19抗體 0.1ml
LAMP-1/CD107a/LAMPA 溶體相關(guān)膜蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Geminin DNA復(fù)制抑制因子抗體 規(guī)格: 0.2ml
RAR α 維甲酸受體-α 抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cystatin D 胱抑素D/半胱蛋白抑制劑D抗體 規(guī)格: 0.2ml
DHRS9 短鏈脫/還原家族9抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-TNIK(Ser764) 磷酸化TRAF2和NCK激相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
AP2 gamma 轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-EIF4B (Ser540) 磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體 規(guī)格: 0.1ml
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