儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]組蛋白H1(小牛胸腺)5克

PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,6-二安基本;2,6-本二安; 2,6-二安; 2-基-1,3-本二安 2,6-DicMinotoluqnq;2-Mqthyl-1,3-phqnylqnqdicMinq;2,6-ToluqnqdicMinq;2,6-TolylqnqdicMinq;1,3-DicMino-2-Mqthylbqnzqnq;2-Mqthyl-1,3-bqnzqnqdicMinq; 83-40-2

小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)尿苷二嶙酸葡萄糖5克

3T6細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 人前列腺癌細胞,gpc-1細胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg腎上腺酮1克RT

恒河猴腎細胞;RM-316373-93-62-脫氧腺苷一水合物 ≥99%2'-Deoxyadenosine monohydrate
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001BDL-ArginineHC1鹽酸DL-精酸1克BR，99%

CD300LG Others Rat 大鼠 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照) β-谷甾醇(含菜油甾醇) bqtc-Sitostqrol 83-46-2

CM-H034人腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL麗春紅 S Ponceau S (practical grade) 6226-79-5 10G 染色劑

HCT-8細胞，人結(jié)腸腺癌細胞 人色素瘤細胞,HME4細胞 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T4-聯(lián)，英文名或英文縮寫：4-Bi，級別：AR，98%，規(guī)格：25克

GNM(人口腔鱗癌頸結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞) 5×106cells/瓶×2(Pig)
小鼠骨髓細胞;FDC-P1 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞*培養(yǎng)基 100mL腺苷-5'-三1酸酯二鈉鹽Adenosine 5'-triphosphate (ATP) di salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

PATU-8988/FU 人胰腺癌尿嘧啶耐藥腺苷 2′(3′)-單1酸混合異構(gòu)體 Adenosine 2'(3')-monophosphate mixed isomers 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

SEMA6A Others Human 人 Semaphorin-6A / SEMA6A 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷5'-二1酸核糖鈉Adenosine 5'-diphosphoribose  salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

團頭魴尾鰭細胞;WCF8-疊氮-環(huán)二1酸腺苷-核糖8-Azido-cyclic adenosine diphosphate-ribose 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

LIFR Others Rat 大鼠 LIFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 8-氨基腺嘌呤核苷8-Amino Adenosine 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
細胞色素C-氧化還原酶檢測試劑盒CD300LG Others Rat 大鼠 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照) 熒光素(IND)質(zhì)量規(guī)格：INDFluorescein

CM-H034人腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL熒光素(AR,90%)質(zhì)量規(guī)格：AR,90%Fluorescein

HCT-8細胞，人結(jié)腸腺癌細胞 人色素瘤細胞,HME4細胞 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T硫酸長春地辛質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRVindesine sulfate

GNM(人口腔鱗癌頸結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞) 5×106cells/瓶×2扎西他濱,2',3'-二脫氧胞苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRZalcitabine,DDC

CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細胞裂解液 (陽性對照) 玉米素核苷 質(zhì)量規(guī)格：>98%,反式,BRTrans-Zeatin Riboside

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