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簡(jiǎn)要描述:副豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品纖維素透析袋500U保存:-20℃ Humanmethoexate,MTXELISAKit人喋呤(MTX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T吧豆醛(劇毒)notonel7exy7e 兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝植物血球凝集素shēng huà shì jì容量:2
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
產(chǎn)品名稱:副豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號(hào):BK-P96915
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
CITRICACID,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE檸檬酸三鈉,二水試劑級(jí)白色粉末RTsigma 英文名稱RatFlt-3ELISAKit大鼠Flt-3(Flt-3)規(guī)格:96T/48T
鹽酸小檗堿,鹽酸黃連素Berberine 質(zhì)量規(guī)格:≥97%(T),BR 小鼠脂肪酸合成酶(FASN)ELISA試劑盒 ,英文名: FASN ELISA Kit 組織總膽汁酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
鹽酸小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Berberine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T HumanFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
京尼平苷酸Geniposidic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98% 人聚集蛋白(Agrin)試劑盒 Human Agrin ELISA Kit 人細(xì)胞(CTX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
京尼平苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Geniposidic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit大鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬骨成型蛋白7(BMP7)試劑盒 Pig Bone morphogenetic protein 7,BMP7 ELISA kit
雙[3,5-二溴-4-(2-羥乙氧基)基]砜(>96.0%(GC))Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人百日咳(PT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雙[4-(2-羥乙氧基)基]砜(>97.0%(GC))Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 植物賴氨酸(lysine)含量化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20 兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)試劑盒 Rabbit Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA Kit
二砜-3,3'-二磺酸二鈉鹽(>95.0%(T))Diphenylsulfone-3,3'-disulfonic Acid Di Salt質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) HumanVitaminB6,VB6ELISAKit人維生素B6(VB6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瘦素受體(Lepti)ELISA試劑盒 ,英文名: Lepti ELISA Kit
5,10-二氫-5,10-二甲基吩嗪(>98.0%(GC)(N))5,10-Dihydro-5,10-dimethylphenazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) 小鼠甲腺原酸脫酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒 ,英文名: DIO3 ELISA Kit PlaVitaminD,VDELISA試劑盒植物維生素D(VD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
副豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Promocell C-22120 Endothelial Cell GrowthMedium MV KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基MV套裝 500ml辛伐他汀羥基酸銨鹽質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Simvastatin Hydroxy Acid, Ammonium Salt
人成纖維細(xì)胞-總RNAHDF-a NAN-氧基索拉菲尼質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Sorafenib N-Oxide
小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-c)(5×105)甲基索拉菲尼-d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Sorafenib-methyl-d3
中國(guó)倉鼠肺細(xì)胞
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